​​高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是色谱法的一个重要分支，应用范围十分广泛，对样品的适用性广，不受分析对象挥发性和热稳定性的限制，包括但不限于高分子化合物、离子型化合物、热不稳定性化合物以及有生物活性的化合物，都能通过搭配不同检测器的HPLC进行分离检测。
历史由来：
       20世纪初，俄国植物化学家茨维特（Tswett）发现一个特别有趣的现象，他将碳酸钙填充进竖立的玻璃管，上方加入植物色素，然用石油醚淋洗，经过一段时间洗脱之后，植物色素在碳酸钙柱中实现分离，由一条色带分散为数条平行的色带，茨维特使用色谱法 chromatography （来自希腊字， chroma 意思是颜色， graphy 意思是记录 - 直译为颜色记录）来描述他的彩色试验。（令人好奇的是, 俄罗斯名字茨维特意思是颜色。）



图1
       20世纪60年代末，科克兰、哈伯、荷瓦斯、莆黑斯、里普斯克等人开发了世界上第一台液相色谱法色谱法色谱法色谱法，开启了色谱时代。
      工作原理：
      高效液相色谱仪由溶剂输送系统、进样系统、分离系统、检测系统、记录及数据处理系统组成。
工作时储液器中的流动相被高压泵压入检测系统，样品溶液经进样器进入色谱系统，被流动相载入色谱柱（固定相）内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附-解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，在其通过检测器时，被转换成信号传送到记录仪，数据以图谱形式输出。




图2 高效液相色谱仪的系统组成
优势特点：
高效液相色谱法有“三高一广”的特点：
①高压：高效液相色谱仪供液和进样压力大，压力为150-350bar。
②高速：分析速度快、流动相流速快，较经典液体色谱法速度要快得多，通常分析一个样品在 15～30 分钟，有些样品甚至在5分钟内即可完成，一般小于 1 小时。
③高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工业精馏塔的分离效能高出许多倍。
④应用范围广：70%以上的有机化合物可用高效液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差的化合物分离分析，具有优势。
高效液相色谱仪的应用：高效液相色谱具有“三高一广”、检测灵敏度好、尤其适用于沸点高且热不稳定生理活性物质的分析，主要被应用于医药、精细化工及化妆品等行业等领域，应用范围较广。在医药研究分析中的应用：
①分离分析药物的组分含量；
②药物生产中进行中间控制；
③分析药物在体内的残量；
④测定药物在各种器官中的代谢产物，特别是研究药物的代谢产物在血清中存在的情况。
在化妆品行业的应用：化妆品对人体皮肤有害物质的含量会影响个人的皮肤健康。采用液相色谱法可以测定化妆品中某些有害物质的成分和含量。
①化妆品中禁用物质中的应用：抗生素、激素、氢醌等；
②化妆品中防腐剂中的应用：甲基异噻唑啉酮、苯氧乙醇、尼泊金酯，再如辛酰羟肟酸等防腐剂助剂，也能进行含量的分析；
③有特定功效的化妆品原料筛查；
④化妆品中防晒剂、着色剂中的应用。

随着科技的进步，色谱应用越来越广泛，必定能为化妆品行业提供强有力的支撑，促进化妆品良性快速地进步。

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